荧光光谱仪发射单色器的作用是筛选样品发射出的荧光信号,分离杂散光与不同波长的发射光,再传输至检测器,常见类型主要分为以下几类。
光栅单色器,这是目前荧光光谱仪最主流的发射单色器。核心元件为衍射光栅,依靠光栅的色散作用,将不同波长的荧光按照角度分开,通过转动光栅来选择目标波长,波长扫描连续可调。光栅单色器分为平面光栅单色器和凹面光栅单色器。平面光栅单色器搭配准直镜、聚焦镜,色散均匀,波长准确度高,杂散光水平较低,分辨率可按需选择,适配绝大多数常规荧光定量、发射光谱扫描测试;凹面光栅把光栅和聚焦功能集成在一块光学元件上,光路结构更简单,元件数量少,光损耗更低,多用于小型化、便携式荧光设备,分辨率相比平面光栅略低。光栅单色器适用波长范围宽,紫外到可见光区域均可覆盖,可做连续波长扫描,适合获取完整荧光发射谱图。
滤光片型单色器,属于非扫描式单色装置,不依靠光栅分光,直接使用固定波长的干涉滤光片选择发射光。结构简单,光通量大,光学元件少,成本低,设备整体体积小巧。缺点是只能选用滤光片对应的离散固定波长,无法连续扫描光谱,只能做单点固定波长检测。一般应用在专用检测设备,比如荧光免疫检测仪、水质快速荧光检测仪器,只需要单一或者少数几个发射波长,不需要采集全光谱。
棱镜单色器,属于早期的色散型单色器,利用不同波长光在棱镜内折射率差异实现分光。棱镜的色散是非线性的,短波区域色散能力强,长波区域色散弱,波长扫描校准比较麻烦,而且紫外波段材料选择受限。相比光栅单色器,杂散光控制难度更高,现在几乎很少用于现代商用荧光光谱仪,仅在部分特种科研装置中少量使用。
全息光栅单色器,属于光栅单色器的细分品类,采用全息光刻工艺制作光栅,相比传统刻划光栅,杂散光水平显著降低,减少散射光带来的背景干扰,对于低浓度、弱荧光样品检测优势明显。全息光栅没有周期性刻划缺陷,信噪比更高,多用于高灵敏度荧光检测、稳态荧光、时间分辨荧光光谱仪,适合痕量物质分析。
各类型适用边界,常规实验室稳态荧光光谱仪大多采用平面全息光栅单色器;便携式现场检测设备优先滤光片单色器;老式设备可见棱镜单色器。选择发射单色器需要兼顾分辨率、杂散光、光通量,高灵敏度测试优先低杂散光全息光栅,快速定点检测可选用滤光片单色器。